作者:霍尔德科技 更新时间:2024-11-08
叶绿素a是估算浮游植物生物量的重要指标,可以通过测定水中浮游植物叶绿素a的含量,掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平,在环境监测中,叶绿素a含量是评价水体富营养化的指标之一。水质叶绿素a测定方法原理是将一定量样品用滤膜过滤截留藻类,研磨破碎藻类细胞,用丙酮溶液提取叶绿素,离心分离后分别于750nm、664nm、647nm和630nm波长处测定提取液吸光度,根据公式计算水中叶绿素a的浓度。下面小编分享一下水质叶绿素a测定的具体步骤。
1.制备水样
在过滤装置上装好玻璃纤维滤膜。根据水体的营养状态确定取样体积,具体可以参考过滤水样体积,用量筒量取一定体积的混匀水样,进行过滤,最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。过滤时负压不超过50kPa,在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤,用镊子将滤膜取出,将有水样的一面对折,用滤纸吸干滤膜水分。
2.研磨
将样品滤膜放置于研磨装置中,加入3ml-4ml丙酮溶液,研磨至糊状。补加3ml-4ml丙酮溶液,继续研磨,并重复1-2次,保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中,用丙酮溶液冲洗研钵及研磨杵,一并转入离心管中,定容至10ml。
3.浸泡提取
将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后,用铝箔包好,放置于4℃避光浸泡提取2h以上,不超过24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀2-3 次。
4.离心
将离心管放入离心机,以相对离心力1000×g(转速 3000 r/min~4000 r/min)离心10min。然后用针式滤器过滤上清液得到叶绿素a的丙酮提取液(试样)待测。
5.水样测定
将试样移至比色皿中,以丙酮溶液为参比溶液,于波长750nm、664nm、647nm、630nm处测量吸光度。750nm波长处的吸光度应小于0.005,否则需重新用针式滤器过滤后测定。
6.计算
最后水样中叶绿素a的质量浓度可以按照相应公式进行计算得出。
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